【产品名称】

通用名称：登革热病毒I/II/III/IV型核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

【包装规格】  20人份/盒、50人份/盒

【预期用途】

本试剂盒对登革热疑似患者血清样本中的登革热病毒核酸进行定性分型检测，为登革热患者的诊断提供辅助手段。检测结果仅供临床参考，最终诊断结果必须结合患者临床表现和其他实验室检测对病情进行综合分析。

登革热（dengue fever, DF）是由登革热病毒（denguevirus, DENV）感染引起的，是流行最为严重的虫媒病毒传染病之一，其传播媒介为埃及伊蚊和白纹伊蚊，主要在热带、亚热带地区流行。登革热病毒属于黄病毒科黄病毒属， 根据表面抗原的不同分为4个血清型。登革热病毒感染的临床表现主要为头疼、发热、乏力、淋巴结肿大及白细胞减少等，严重者可出现出血或休克以及肝损伤，甚至死亡。近年来，气候变化、 城市化及旅游业的快速发展等为登革热的传播和扩散提供了更快捷、便利的条件，使登革热的流行区域不断扩大。因此建立简便、特异、快速的登革热病毒病原学诊断方法，在登革热临床诊断中具有重要意义。

【检验原理】

本试剂盒采用Taqman探针荧光PCR检测法，选择登革热病毒I/II/III/IV型特异性的保守区域作为检测靶基因，设计荧光检测的特异性的引物探针，I/II/III/IV型特异性探针5’分别标记为FAM/ VIC（HEX）/ROX/CY5荧光基团，3’BHQ1或BHQ2淬灭基团。提取的RNA经逆转录为cDNA，在PCR扩增过程中，特异性引物和探针分别与各自靶序列结合，当Taq酶遇到结合在靶序列上的探针时，发挥5’端外切酶功能，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步，通过1个反应液实现对样本中的登革热病毒I/II/III/IV型的定性检测。

【储存条件及有效期】

1. 未开封的试剂盒：应在避光、温度不高于30℃下储存，有效期12个月。
2. 撕开密封袋后，管内的冻干试剂应立即使用。
3. 冻干的核酸反应液复溶后立即进行RT-PCR检测，否则应避光储存于-25℃至-15℃，有效期为1周，避免反复冻融（应限制在2次以内）。
4. 冻干的阳性对照复溶后，应储存于-25℃至-15℃，有效期为1周，避免反复冻融（应限制在2次以内）。
5. 运输条件: 低于37℃可稳定运输1个月。
6. 生产日期、生产批号及失效日期见包装标签。

【适用仪器】

ABI7500荧光定量PCR仪、ABI7500Fast实时荧光定量PCR系统、QuantStudio®5实时荧光定量PCR系统、宏石SLAN-96P全自动医用PCR分析系统、LightCycler® 480荧光定量PCR系统、杭州博日FQD-96A荧光定量PCR仪、雅睿MA-6000荧光定量PCR仪、伯乐BioRad CFX96实时荧光定量PCR仪和伯乐CFX Opus 96实时定量PCR仪。

【样本要求】

1. 样本采集： 新鲜血清

血清样本采集：用无菌注射器采集被检者3-5mL静脉血于真空采血管中（最好带分离胶），室温放置不得超过4小时，3000rpm离心10分钟，吸取上层血清（切勿吸入红细胞）转入另一无菌离心管中备用。

2. 样本采集注意事项：样本在采集、保存和转移时避免污染。

样本安全性：所有样本均视为有潜在的感染性，操作时按国家相关标准执行。

3. 存放

采集的样本应尽快送检，24小时内无法检测的样本则应置于-18℃以下保存，保存时间不超过2个月，-70℃以下长期保存。样本应设立专库或专柜单独保存。