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人 CYP2C9 和 VKORC1 基因多态性检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

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所属分类:药物基因个性化检测

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人 CYP2C9 和 VKORC1 基因多态性检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

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0513-80562880
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产品简介

【产品名称】

CYP2C9 和 VKORC1 基因多态性检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

【包装规格】

24人份/盒

【预期用途】

本试剂盒用于体外定性检测人全血样本基因组 DNA 中 CYP2C9*3(rs1057910,1075A>C)、VKORC1(rs9923231,-1639G>A)两个位点多态性。

华法林是目前临床上使用较多的口服抗凝药物,主要用于预防和治疗血栓栓塞性疾病。但华法林的有效治疗范围较窄且不同种族间及个体间存在着较大差异[1]。据统计,不同个体间稳定剂量的差异可达 20 倍以上[2],服用华法林的患者中,每年有 15.2%的人发生出血副作用,其中致命性的大出血占 3.5%[3]。药物基因组学研究表明,华法林的靶酶 VKORC1 和代谢酶 CYP2C9 的基因遗传多态性是影响华法林用药剂量差异性的重要因素。华法林是维生素 K 环氧化物还原酶 VKORC1 的特异性抑制剂,从而抑制维生素 K 参与的凝血因子合成,产生抗凝作用。大量研究发现,VKORC1 启动子的基因多态性是影响华法林需求剂量中种族差异和个体差异的最主要因素[4]。华法林由 CYP2C9 代谢,而其突变体使华法林代谢速率大大降低,用药个体在使用初期就有较高的出血危险性,其出血的危险性增加 2-3 倍[5]。华法林用药相关基因 CYP2C9*3、VKORC1 位点多态性信息见下表:

基因

等位基因

华法林用药剂量

中国人频率(%)

CYP2C9

*1

正常

92.0

CYP2C9

*3

降低

4.6

VKORC1

-1639G

正常

8.8

VKORC1

-1639A

降低

91.2

本产品检测结果仅代表对人类 CYP2C9*3 和 VKORC1(-1639G>A)的检测结果,为临床医生个体化用药提供参考。检测结果仅供临床参考,不应作为患者是否用药的唯一依据,临床医生应结合患者病情、疗效及其他实验室检测指标等对本产品的检测结果进行综合判断。

【检验原理】

本试剂盒采用自主改进的扩增阻碍突变系统专利技术,将 ARMS(Amplification refractory mutation system)技术与 Taqman 探针相结合方法检测 CYP2C19 代谢酶基因的单核苷酸多态性(SNP)。分别针对野生型和突变型设计 ARMS 引物,由于在 ARMS 引物设计上,人为的在 3’末端引入更多的错配碱基,提高了检测特异性;且在体系中加入 Taqman 探针,Taqman 探针分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR 扩增时,Taq 酶的 5’-3’的外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号。检测体系中含有内标,通过内标核酸扩增是否正常来监测待测样本的处理过程以及检测中是否存在 PCR 抑制反应,避免检测的假阴性。通过 2 种反应液、不同的荧光标记实现对 CYP2C19 代谢酶基因单核苷酸多态性(SNP)检测。

【储存条件及有效期】

本试剂盒应储存于-18℃~-25℃的避光条件下,有效期12个月。开封、反复冻融次数不得多于4次。

生产日期、失效日期:见包装盒。

【适用仪器】

ABI7500荧光定量PCR仪,宏石SLAN-96P荧光定量PCR仪。

【样本要求】

1. 样本采集

新鲜采集的 EDTA 抗凝血液。

2. 存放

待测样本在 2-8℃保存不应超过 7 天;-18℃以下保存不超过 8 个月,冷冻样品提取应当在样品完全融解后混匀进行,应避免反复冻融,反复冻融不多于 4 次。

3. 运输

建议采取干冰或冰壶加冰的低温运输。

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