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肠道病毒核酸检测试剂盒(酶切探针恒温扩增法)
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0513-80562880货号 | 产品名称 | 包装规格 |
HWTS-EV015A | 肠道病毒核酸检测试剂盒(酶切探针恒温扩增法) | 50人份/盒 |
本试剂盒用于体外定性检测人的咽拭子中的肠道病毒核酸。
手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)主要是由肠道病毒感染引起的急性传染病[1],多发生于5岁以下儿童,可引起手、足、口腔等部位的疱疹,少数患者发病后迅速累及神经系统,表现为脑干脑炎、脑脊髓炎、脑脊髓膜炎等,发展为循环衰竭、神经源性肺水肿的患儿病死率高[2]。引发手足口病的肠道病毒有20多种(型),柯萨奇病毒A组的16、4、5、9、10型,B组的2、5型,以及肠道病毒71型,均为手足口病较常见的病原体,其中以柯萨奇病毒A16型(Cox A16)和肠道病毒71型(EV 71)最为常见[3-4]。
本试剂盒为手足口病患者的诊断提供辅助手段。检测结果仅供临床参考,最终诊断应紧密结合其他临床指标综合考虑。
本试剂盒采用酶切探针恒温扩增技术(Enzymatic Probe Isothermal Amplification,EPIA),针对EV的高度保守区域设计特异性引物与含RNA碱基的探针(rProbe),同时加入Bst酶、RNaseH和逆转录酶等,其中rProbe的RNA碱基左、右两端分别标记荧光基团和淬灭基团。首先将提取的RNA逆转录为cDNA,利用Bst酶的DNA聚合酶活性和链置换活性扩增待测靶标,RNaseH酶可切割靶标-探针杂交链上的RNA碱基,使得rProbe的荧光基团和淬灭基团分离从而发出荧光。此外,残留的rProbe RNA碱基左侧片段可作为引物继续延伸形成产物,使得产物进一步累积。荧光信号随着产物的形成不断累积,从而实现对目标核酸的检测。
本试剂盒于-18℃以下保存,试剂盒有效期为9个月。反复冻融次数不得多于4次,在-18℃以下的避光条件下运输,可稳定保存5天。
生产日期及有效期见包装标签。
ABI 7500荧光定量PCR仪、上海宏石SLAN-96P荧光定量PCR仪
样本采集
新鲜采集的咽拭子。
咽拭子样本采集:用聚酯纤维头拭子适度用力多次抹擦悬雍垂(腭垂或小舌)后部咽后壁及双侧扁桃体,避免触及舌部,取出后置采样管,折断手接触部位的塑料柄,使拭子浸泡至采样液中,旋紧管盖。
储存
待测样本在2~8℃保存不超过6天,-18℃以下保存不超过3个月, -70℃以下条件样本长期保存、样本应避免反复冻融,反复冻融次数不超过4次。
运输
采用泡沫箱加干冰密封进行运输,运输时间最多不超过5天。
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